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目的:研究增强细胞缝隙连接功能对三阴性乳腺癌细胞放疗敏感性的影响。方法运用脂质体2000将pcDNA/5-Cx43表达载体转染HCC70(三阴性)、MCF-7( ER阳性)和SK-BR3细胞( HER-2阳性);细胞经不同剂量电离辐射(0、5、10、15 Gy)照射后运用Western blot测定细胞中Cx43蛋白水平;荧光示踪法测定细胞连接功能,运用MTT法、克隆形成实验、AnnexinV-FITC/PI双染法和流式细胞仪分别测定细胞的增殖、克隆形成能力以及细胞凋亡情况。结果转染的HCC70-Cx43、MCF-7-Cx43和SK-BR3-Cx43细胞中Cx43蛋白水平显著增加,经不同剂量辐照后Cx43蛋白表达量逐渐增加,具有剂量依赖效应;荧光示踪结果显示随着电离辐射剂量的增加,荧光密度逐渐升高;HCC70-Cx43、MCF-7-Cx43和SK-BR3-Cx43细胞活性和克隆形成能力逐渐降低,具有剂量-时间依赖效应;相同情况下,HCC70-Cx43细胞的增殖能力和克隆形成能力的抑制作用高于MCF-7-Cx43和SK-BR3-Cx43细胞;AnnexinV-FITC/PI和流式细胞仪结果显示,随着辐照剂量的增加,细胞凋亡率逐渐升高。结论增强细胞缝隙连接功能可提高乳腺癌细胞,尤其是三阴性乳腺癌细胞的放疗敏感性;辐射能增强乳腺癌细胞的缝隙连接功能,二者协同作用增强三阴性乳腺癌的细胞毒性。

作者:郑育强;丁锦辉;宋磊

来源:实用肿瘤学杂志 2016 年 30卷 2期

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作者:
郑育强;丁锦辉;宋磊
来源:
实用肿瘤学杂志 2016 年 30卷 2期
标签:
三阴性乳腺癌 缝隙连接 Cx43 电离辐射 细胞凋亡 Triple-negative breast cancer Gap junctions Cx43 Ionizing radiation Apoptosis
目的:研究增强细胞缝隙连接功能对三阴性乳腺癌细胞放疗敏感性的影响。方法运用脂质体2000将pcDNA/5-Cx43表达载体转染HCC70(三阴性)、MCF-7( ER阳性)和SK-BR3细胞( HER-2阳性);细胞经不同剂量电离辐射(0、5、10、15 Gy)照射后运用Western blot测定细胞中Cx43蛋白水平;荧光示踪法测定细胞连接功能,运用MTT法、克隆形成实验、AnnexinV-FITC/PI双染法和流式细胞仪分别测定细胞的增殖、克隆形成能力以及细胞凋亡情况。结果转染的HCC70-Cx43、MCF-7-Cx43和SK-BR3-Cx43细胞中Cx43蛋白水平显著增加,经不同剂量辐照后Cx43蛋白表达量逐渐增加,具有剂量依赖效应;荧光示踪结果显示随着电离辐射剂量的增加,荧光密度逐渐升高;HCC70-Cx43、MCF-7-Cx43和SK-BR3-Cx43细胞活性和克隆形成能力逐渐降低,具有剂量-时间依赖效应;相同情况下,HCC70-Cx43细胞的增殖能力和克隆形成能力的抑制作用高于MCF-7-Cx43和SK-BR3-Cx43细胞;AnnexinV-FITC/PI和流式细胞仪结果显示,随着辐照剂量的增加,细胞凋亡率逐渐升高。结论增强细胞缝隙连接功能可提高乳腺癌细胞,尤其是三阴性乳腺癌细胞的放疗敏感性;辐射能增强乳腺癌细胞的缝隙连接功能,二者协同作用增强三阴性乳腺癌的细胞毒性。