目的:尝试优化体外培养Balb/c小鼠胃Cajal间质细胞 (interstitial cells of Cajal, ICC) 的实验方法, 为深入探索该细胞的生理病理作用机制提供基础.方法:无菌条件下取出小鼠胃组织, 使用酶解法消化分离细胞, 将细胞悬液接种于含有SCF (干细胞因子) 的M199培养基中培养, 并进行传代.倒置显微镜下观察不同时间段细胞生长状态, 采用ICC特异性标志物c-Kit (酪氨酸激酶受体) 进行免疫荧光鉴定.结果:细胞培养24 h后基本已贴壁, 呈梭形或三角形, 有短突起;72 h后细胞胞体变大, 突起伸长;5 d后, 细胞之间通过突起彼此相互连接, 开始形成网状结构;传代后细胞依然保持其固有特征.免疫荧光鉴定可见细胞c-Kit抗体荧光染色阳性.结论:使用酶解法成功分离细胞, 细胞数量较多但不增殖, 传代后可见细胞纯度较好, 稳定培养3周以上后细胞形态逐渐发生变化并开始凋亡.
作者:李亚欢;王淑艳;张冬梅;赵冉冉;王飞;蒋锋利;赵宏照;李丽娜;李翠;宗晨钟;陈萌
来源:现代生物医学进展 2018 年 18卷 11期