目的:获得A/B血型抗原的模拟多肽,并将其与夹心化学发光免疫分析(chemiluminescence immunoassay,CLIA)相结合,以开发更有效的方法来测量A/B抗体的效价.方法:分别用NaM87-1F6和HEB-29对噬菌体12肽库进行三轮淘选.对经酶联免疫吸附实验(ELISA)确定的阳性菌斑进行测序分析,根据其氨基酸组成合成模拟多肽,并通过竞争性ELISA、凝集抑制等方法检测其抗原性.随后将获得的模拟多肽与CLIA结合,检测A、B抗体效价,制作标准曲线以及与现有的微柱凝胶法(CAT)进行相关性对比.结果:经过三轮淘选和相关鉴定后得到13个与抗A抗体和19个与抗B抗体特异性相互作用的噬菌体克隆,其中分别有9个(MTRIQLRMMRLH)和12个(PQMSRHRMRMLP)展示相同的氨基酸序列,据此合成的多肽分别命名为MTR和PQM.竞争性ELISA结果表明,MTR能够特异性拮抗A抗体和A抗原的替代多肽的免疫结合;PQM能够特异性拮抗B抗体和B抗原的替代多肽的免疫结合.凝集抑制实验表明MTR/PQM可以特异性抑制A/B型红细胞与抗A/B之间的相互作用.结合模拟肽的夹心CLIA具有较宽的线性范围(2-2048)和良好的线性相关系数(对于A抗体R2=0.9566,对于B抗体R-0.9762).基于CLIA方法和CAT测得的抗体滴度结果高度相关(P＜0.001).结论:MTR和PQM有良好的A或B抗原性,具有成为其人工替代品的潜能.
作者：周水梅；沈长新；宋晶晶；王娇；林晨瑶；黄爽；贺学宇
来源：现代生物医学进展 2019 年 19卷 15期
