目的:通过结构分析和定点突变,构建干扰素α-2bHis89/His159(IFNα-2bHis89/His159),以期获得高性能干扰素突变体.方法:采用PCR体外定点突变技术,使干扰素α-2b基因的第89位密码子由编码酪氨酸的TAC突变为编码组氨酸的CAC,第159位密码子由编码谷氨酸的GAA突变为编码组氨酸的CAC.将扩增片段克隆入pET23b表达载体,重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3).表达的IFNα-2bHis89/His159经包涵体变性、复性、DEAE层析和CM层析纯化后,用WISH-VSV系统进行生物活性测定.以SD大鼠进行初步药代动力学研究.结果:IFNα-2bHis89/His159主要以包涵体形式表达,表达量占菌体总蛋白的40
作者：王秀；刘金毅；牛晓霞；孙玉军；金颖；彭秀娟；王艳
来源：中国生物工程杂志 2008 年 28卷 12期
