目的:通过定点突变,构建集成干扰素突变体Ⅱ(IFN-Con-m2),以期获得兼具高效作用和可定点聚乙二醇(PEG)修饰的新型药物分子.方法:采用PCR体外定点突变技术,使集成干扰素突变体I(IFN-Con-m1)基因的第86位密码子由TAC突变为TGC.将扩增片段克隆入pET-23b表达载体,重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3).IPTG诱导后,表达的IFN-Con-m2经包涵体变复性、疏水层析、DEAE层析和凝胶过滤层析等纯化后,用WISH-VSV系统进行生物活性测定.结果:IFN-Con-m2以包涵体形式表达,表达量占菌体总蛋白的30
作者:牛晓霞;刘金毅;杨轶;吴晓东
来源:中国生物工程杂志 2006 年 26卷 12期