目的 构建高效且可供单甲氧基聚乙二醇马来酰亚胺(mPEG-MAL)定点修饰的集成干扰素突变体(IIFNm108),并进行表达、纯化及鉴定.方法 采用同源序列对比、空间结构模拟并结合α干扰素与受体结合的特点设计突变位点.用重叠延伸PCR法,扩增IIFNm108基因,与pET-23b载体连接,构建重组表达质粒pET-23b-IIFNm108,转化E. coli BL21(DE3),IPTG诱导表达,所得包涵体经变性、复性、DEAE阴离子交换及凝胶过滤两步层析纯化后,进行各项鉴定.结果 重组表达质粒经双酶切及测序鉴定证明构建正确.目的 蛋白的表达量占菌体总蛋白的30
作者:张静;刘金毅;周敏毅;牛晓霞;曹凯
来源:中国生物制品学杂志 2009 年 22卷 5期