目的:利用口蹄疫病毒非结构蛋白3B单克隆抗体建立液相阻断ELISA检测方法,进行定量检测口蹄疫病毒培养液中的非结构蛋白含量.方法:首先将工作浓度的3B单抗与待测病毒培养液过夜结合反应,然后取结合液转移至用3B蛋白包被好的酶标板上,用标准3B蛋白做12个梯度做对照,同时设阴性对照和空白对照.通过回归分析算出口蹄疫病毒培养液中的非结构蛋白3B含量.结果:回归曲线呈典型的S形,符合4参数logit曲线拟合,相关系数R=0.99,检测范围为5~1500ng/ml,半数抑制浓度(Ic50)为130ng/ml.结论:该方法能特异、敏感的检测到病毒培养液中的非结构蛋白3B成分,并进行定量.
作者:李永亮;卢曾军;杨苏珍;田美娜;谢宝霞;刘在新
来源:中国生物工程杂志 2009 年 29卷 11期