胸腺素α1(thymosin α1,Tα1)作为免疫调节剂在T细胞成熟、分化和功能发挥方面扮演着重要角色,临床主要被用于免疫缺陷、病毒感染和自身免疫性疾病(HBV、HCV、HIV和癌症等)的治疗.由于组织提取Tα1原料限制、化学合成价格昂贵和传统表达系统(原核或转基因动物)存在安全隐患,使Tα1临床应用受限.用烟草表达Tα1,首先按植物偏爱密码子设计合成tα1基因(124bp)并重组串联成4×tα1,构建植物双元表达载体p35s::4×tα1(含twin T-DNAs),用农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导法转化烟草.PCR和Southern blot结果证实获得了14转基因烟草,并发现靶基因4×tal与筛选基因npt Ⅱ在转基因烟草T0代基因组中发生了分别整合.对177株T1代转基因烟草检测,获得了2株仅整合4×tα1而无筛选标记npt Ⅱ的植株.ELISA结果显示,4×Tα1在转基因烟草叶片中的表达量介于180.46(81#)～756.87 ng/g·fw(86~#),Western blot证实植物源4×Tα1具有免疫活性.MTT实验结果显示,植物源的4×Tα1蛋白具有促进BALB/C鼠脾淋巴细胞增殖的功能,为用安全植物表达系统生产包括Tα1在内的药用蛋白提供重要参考.
作者：芦丽亚；宋维；游晓慧；江婷；赵凌侠
来源：中国生物工程杂志 2010 年 30卷 3期
