以氧化葡萄糖酸杆菌(Gluconobacter oxydans)NH-10基因组DNA为模板,扩增得到D-阿拉伯糖醇脱氢酶基因arDH,将其克隆到大肠杆菌表达栽体JM109(DE3)中进行诱导表达.SDS-PAGE电泳分析ArDH的分子量约为30 kDa,是一个短链脱氢酶,既能催化D-阿拉伯糖醇氧化为D-木酮糖,又能催化D-木酮糖还原为D-阿拉伯糖醇.催化氧化反应时,对D-阿拉伯糖醇的Km为60.67 mmoL/L,Vmax为0.803 U/mg;它能同时依赖于NAD+和NADP+,但是更加偏好辅酶NAD+;最适pH为12.0.还原反应对D-木酮糖的Km为36.39 mmol/L,Vmax为1.71 U/mg;最优pH为7.0,最适温度均为30℃.
作者:戴小燕;沈晓波;朱宏阳;徐虹
来源:中国生物工程杂志 2010 年 30卷 11期