目的:基于转酮酶基因缺失菌株MG1655-ΔtktA,研究启动子替换L-组氨酸操纵子前导区及6-磷酸葡萄糖脱氢酶基因zwf、6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶基因gnd、PRPP合成酶基因prs的过表达对大肠杆菌产L-组氨酸的影响.方法:通过Red重组系统用T5启动子替换L-组氨酸操纵子前导区；构建gnd和zwf串联表达载体gnd-zwf-pSTV28,prs表达载体prs-pQE30.通过摇瓶发酵,考察上述改造对大肠杆菌积累L-组氨酸的影响.结果:测定结果显示,改造菌株的发酵液中均能实现L-组氨酸积累,平均分别为MG 1655 - AtktA-PT5,60.12 mg/L；MG1655-ΔtktA-PT5(prs-pQE30),66.47mg/L;MG1655-ΔtktA-PT5(zuf-gnd-pSTV28),89.69 mg/L;MG1655-ΔtktA-PT5(prs-pQE30,zwf-gndpSTV28),111.56mg/L.结论:L-组氨酸操纵子前导区的修饰使菌株合成L-组氨酸的能力大大增强,而氧化戊糖磷酸途径的加强和PRPP合成酶活性的提高能够进一步提高产量.
作者：卢利宁；程永松；谢希贤；徐庆阳；陈宁
来源：中国生物工程杂志 2012 年 32卷 4期
