目的:研究瞬时受体电位通道蛋白3(transient receptor potential channel 3,TRPC3)是否参与糖氧剥夺(oxygen glucose deprivation,OGD)少突胶质细胞的凋亡.方法:以原代培养的新生SD大鼠少突胶质细胞为对照组,以OGD2h的少突胶质细胞为模型组,将模型组+Pyr3阻断设为处理组.采用蛋白质免疫印迹法检测TRPC3蛋白的表达水平,MTT试剂盒比色法检测各组细胞存活率,AnnexinV-FITC试剂盒染色后经流式细胞仪检测细胞凋亡,fluo-3染色后经流式细胞仪和激光共聚焦显微镜测定胞内游离钙的变化.结果:少突胶质细胞A2B5和MBP特异性标记阳性,细胞纯度可达到95％以上;少突胶质细胞OGD2h成功建立OGD模型;OGD组TRPC3蛋白表达增加;OGD组细胞活性为(54.34±6.55)％,凋亡率为(24.24±0.86)％,与对照组有显著差异(P＜0.05),Pyr处理组细胞存活率为(72.26±5.41)％,凋亡率为(14.82±0.28)％,与OGD组有显著差异(P＜0.05);OGD组胞内游离钙浓度显著升高,而Pyr3阻断以后可以部分抑制其升高.结论:TRPC3表达增加介导胞内游离钙离子水平的升高可能是OGD少突胶质细胞凋亡的重要原因之一.
作者：孟赞；徐丹；李真；李静；李刚；刘永刚；刘兆雨；吴宏；唐勇
来源：中国生物工程杂志 2015 年 35卷 4期
