为了选育精氨酸高产菌株,基于谷氨酸棒杆菌的基因组尺度代谢网络模型的指导,以钝齿棒杆菌(Corynebacterium crenatum)MT-M4为出发菌株,通过基因敲除技术构建了proC和putP敲除菌株.摇瓶发酵结果表明,proC敲除菌株精氨酸产量达到9.94g/L,较出发菌株提高了15.90％,葡萄糖转化率提高了26.02％.由于其生长受到明显抑制,因此在发酵液中外源添加24mmol/L的脯氨酸,结果发现其精氨酸产量达到12.22g/L,且菌株恢复生长.putP敲除菌株精氨酸产量达到12.23g/L,较出发菌株提高了42.70％,葡萄糖转化率提高了49.31％.以上结果显示,putP的敲除比proC的敲除更有利于精氨酸的合成,putP的敲除对菌株的生理代谢基本无影响且无需外添加脯氨酸.
作者：万方；张斌；陈民良；陈进聪；陈雪岚
来源：中国生物工程杂志 2015 年 35卷 8期
