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在为维生素B12生产菌株脱氮假单胞茵确立合适的接合转移操作条件的基础上,通过单交换的方式,将vgb基因整合到脱氮假单胞茵染色体上,获得了vgb重组菌株Pvgb-16,并通过13C同位素标记实验,探索VHb蛋白对脱氮假单胞茵碳中心代谢流变化和维生素B12合成的影响.研究结果表明,在相同的供氧条件下,vgb重组菌株Pvgb-16拥有更高的比生长速率和比产物合成速率,与出发菌株相比分别提升了22%和52%.碳代谢通量分布分析表明,vgb重组菌株Pvgb-16的PP途径改善,提升了NADPH合成通量;甘氨酸由甜菜碱合成的通量上升,促进了前体物质氨基乙酰丙酸的合成,进一步加速维生素B12的合成.总体来看,含vgb基因的重组菌株与出发菌株相比在促进茵体的生长、维生素B12的合成速率及得率上都有显著效果,对进一步的发酵生产应用研究具有重要意义.

作者:施慧琳;王泽建;吴杰群;郭美锦;储炬;庄英萍

来源:中国生物工程杂志 2016 年 36卷 9期

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作者:
施慧琳;王泽建;吴杰群;郭美锦;储炬;庄英萍
来源:
中国生物工程杂志 2016 年 36卷 9期
标签:
脱氮假单胞茵 维生素B12 碳中心代谢流分析 vgb基因 Pseudomonas denitrificans Vitamin B12 Central carbon metabolic flux analysis vgb gene
在为维生素B12生产菌株脱氮假单胞茵确立合适的接合转移操作条件的基础上,通过单交换的方式,将vgb基因整合到脱氮假单胞茵染色体上,获得了vgb重组菌株Pvgb-16,并通过13C同位素标记实验,探索VHb蛋白对脱氮假单胞茵碳中心代谢流变化和维生素B12合成的影响.研究结果表明,在相同的供氧条件下,vgb重组菌株Pvgb-16拥有更高的比生长速率和比产物合成速率,与出发菌株相比分别提升了22%和52%.碳代谢通量分布分析表明,vgb重组菌株Pvgb-16的PP途径改善,提升了NADPH合成通量;甘氨酸由甜菜碱合成的通量上升,促进了前体物质氨基乙酰丙酸的合成,进一步加速维生素B12的合成.总体来看,含vgb基因的重组菌株与出发菌株相比在促进茵体的生长、维生素B12的合成速率及得率上都有显著效果,对进一步的发酵生产应用研究具有重要意义.