目的:探讨 XIAP(X-linked Apoptosis Inhibitor of Protein)介导的 PTEN neddylation 修饰对结肠癌细胞系SW480增殖和迁移能力的影响以及临床意义.方法:利用免疫组织化学技术对人结直肠癌及癌旁组织芯片中neddylation E3连接酶XIAP的表达情况进行检测,通过 Western blot验证临床标本中人结直肠癌与癌旁组织中XIAP的表达情况;利用Co-IP检测SW480细胞系内源PTEN与XIAP的相互作用;利用CRISPR Cas9技术构建XIAP敲除的SW480细胞系,免疫沉淀技术检测XIAP敲除的SW480细胞系中PTEN的neddylation修饰水平;变性条件下裂解临床结直肠癌与癌旁组织,利用免疫沉淀技术检测人结直肠癌与癌旁组织中PTEN的neddylation修饰水平;分别在XIAP敲除的SW480细胞系与对照组SW480细胞系中回转或不回转FLAG-PTEN-Nedd8融合质粒来模拟恢复或者不恢复SW480细胞系中PTEN的neddylation修饰水平,分别采用CCK8与Transwell实验探索XIAP-PTEN neddylation调控轴对SW480细胞增殖与迁移的影响.结果:结直肠癌组织中XIAP表达高于癌旁组织;结肠癌细胞SW480中PTEN与XIAP具有相互作用;敲除XIAP抑制了 PTEN neddylation修饰水平;结直肠癌组织PTEN neddylation修饰水平高于癌旁组织;敲除XIAP显著抑制SW480细胞的增殖和迁移能力,而过表达FLAG-PTEN-Nedd

作者：袁淑辉；李少华；方威；彭志强；张令强

来源：中国生物工程杂志 2022 年 42卷 5期