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以RT-PCR方法,从经丝裂原诱导的猪外周血淋巴细胞总RNA中扩增出编码猪IFNγ的基因.经测序证实后插入载体pJLA-503,并实现在大肠杆菌中的高表达.表达产物以包涵体形式存在,经7mol/L盐酸胍变性及精氨酸存在的情况下复性.再经DEAE-Sepharose离子交换柱、Sephdex-200凝胶过滤柱分离获得电泳单一纯猪IFN-γ蛋白,细胞病变抑制实验检测纯化产物有干扰素活性.

作者:郭瀛军;吴丹;陈蕊雯;孙树汉

来源:生物工程学报 2001 年 17卷 2期

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作者:
郭瀛军;吴丹;陈蕊雯;孙树汉
来源:
生物工程学报 2001 年 17卷 2期
标签:
γ干扰素 基因表达 分离纯化 大肠杆菌
以RT-PCR方法,从经丝裂原诱导的猪外周血淋巴细胞总RNA中扩增出编码猪IFNγ的基因.经测序证实后插入载体pJLA-503,并实现在大肠杆菌中的高表达.表达产物以包涵体形式存在,经7mol/L盐酸胍变性及精氨酸存在的情况下复性.再经DEAE-Sepharose离子交换柱、Sephdex-200凝胶过滤柱分离获得电泳单一纯猪IFN-γ蛋白,细胞病变抑制实验检测纯化产物有干扰素活性.