利用PCR技术克隆人乳头瘤病毒HPV-16 L1蛋白编码基因,将其重组于pUCmT和pBI121中,构建含HPV-16L1基因的植物双元表达载体pBI-L1,L1基因由CaMV 35S启动子控制表达.采用叶盘共培育法经根瘤农杆菌介导转化烟草(Nicotiana tobacum L.),获得HPV-16L1转基因烟草植株.经PCR及Southern杂交分析,HPV-16L1基因整合到烟草基因组中;Western blot和ELISA分析检测显示转基因烟草叶片蛋白可与HPV-16 L1单克隆抗体特异性反应,且定位于55kD处,其最高表达量占烟草叶片总可溶蛋白的0.076
作者：刘红莉；陈宏伟；李文生；雷霆；王喆之；王一理；司履生
来源：生物工程学报 2004 年 20卷 6期
