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目的 对人乳头瘤病毒18型(human papilloma virus 18,HPV18)病毒样颗粒(virus-like particles,VLPs)进行特征分析.方法 采用质谱技术分析HPV18 VLPs(重组大肠埃希菌表达系统表达L1蛋白,自组装成为VLPs)蛋白质一级结构,圆二色谱技术分析蛋白质二级结构,高效液相色谱、透射电镜和动态光散射技术分析蛋白质三级和四级结构;同时采用假病毒中和试验分析HPV18 VLPs的免疫原性,SDS-PAGE法分析样品纯度.结果 HPV18 VLPs蛋白翻译后修饰主要包括氧化和去酰胺化,完整L1单体分子量约56 000;二级结构中螺旋、折叠、转角、不规则卷曲的比例分别为8.4%、46.1%、18.5%、30.2%;颗粒纯度达99%以上,且形态饱满完整,大小均一,直径约60 nm.HPV18 VLPs诱导小鼠产生中和抗体滴度的几何均值达3 000以上.HPV18 VLPs中完整L1单体含量达95%以上.结论 HPV18 VLPs结构完整,颗粒大小均一,纯度高,免疫原性良好,本研究为宫颈癌疫苗安全性和有效性的评价奠定了基础.

作者:曹欢欢

来源:中国生物制品学杂志 2020 年 33卷 8期

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作者:
曹欢欢
来源:
中国生物制品学杂志 2020 年 33卷 8期
标签:
人乳头瘤病毒18型 病毒样颗粒 蛋白质结构 免疫原性
目的 对人乳头瘤病毒18型(human papilloma virus 18,HPV18)病毒样颗粒(virus-like particles,VLPs)进行特征分析.方法 采用质谱技术分析HPV18 VLPs(重组大肠埃希菌表达系统表达L1蛋白,自组装成为VLPs)蛋白质一级结构,圆二色谱技术分析蛋白质二级结构,高效液相色谱、透射电镜和动态光散射技术分析蛋白质三级和四级结构;同时采用假病毒中和试验分析HPV18 VLPs的免疫原性,SDS-PAGE法分析样品纯度.结果 HPV18 VLPs蛋白翻译后修饰主要包括氧化和去酰胺化,完整L1单体分子量约56 000;二级结构中螺旋、折叠、转角、不规则卷曲的比例分别为8.4%、46.1%、18.5%、30.2%;颗粒纯度达99%以上,且形态饱满完整,大小均一,直径约60 nm.HPV18 VLPs诱导小鼠产生中和抗体滴度的几何均值达3 000以上.HPV18 VLPs中完整L1单体含量达95%以上.结论 HPV18 VLPs结构完整,颗粒大小均一,纯度高,免疫原性良好,本研究为宫颈癌疫苗安全性和有效性的评价奠定了基础.