目的研究重组人乳头瘤病毒6型(human papillomavirus type 6, HPV-6)病毒样颗粒(virus-like particle, VLP)的免疫原性. 方法重组杆状病毒在昆虫细胞中表达制备的HPV-6 L1 VLP(L1-VLP)和HPV-6 L1+L2 VLP(L1+2-VLP)经鉴定后,用于免疫BALB/c小鼠,对诱导的体液免疫和细胞免疫反应进行了检测. 结果电镜观察显示L1-VLP和L1+2-VLP二者形态上无明显差异,为圆形颗粒,直径约50nm,SDS-PAGE和Western blot分析表明,L1+2-VLP中L1和L2蛋白摩尔比例为4∶1.用ELISA法测定免疫小鼠血清抗体滴度,加佐剂L1-VLP免疫组和加佐剂L1+2-VLP免疫组血清针对HPV-6 L1 VLP的滴度在1∶10000以上,高于未加佐剂组免疫血清滴度(1∶2000),L1+2-VLP免疫诱导出了特异于L2抗原的抗体.血清抗体主要识别HPV-6构象依赖性抗原表位,与HPV-11抗原显示出一定的交叉反应,而与HPV-16无明显交叉反应.免疫小鼠脾淋巴细胞体外经HPV-6 L1 VLP再激活后出现了特异性增殖反应,3H-TdR掺入值与未免疫组之间差异有显著性(P<0.01),L1-VLP和L1+2-VLP两组间差异无显著性(P>0.05),L1-VLP和L1+2-VLP免疫组刺激指数(SI)分别为6.4和6.2,阴性对照组SI为1.1.HPV-6 L1 VLP再刺激特异地诱导免疫组脾淋巴细胞IL-2和IL-10分泌显著增加,与未免疫组之间差异有显著性(P<0.01),
作者:王淼;陈莲凤;韩晔华;邹宇宏;霍淑敏;司静懿;宋国兴
来源:中华微生物学和免疫学杂志 2003 年 23卷 2期