为了有效治疗乙肝病而研究了将抗乙肝病毒表面抗原单链抗体(single-chain Fv against HBV surface antigen,HBscFv)与临床治疗乙肝常用的γ-干扰素(γ-interferon,IFNγ)连接的融合蛋白(HBscFv-IFNγ).采用重叠PCR法将基因hbscfv与ifnγ连接成hbscfv-ifnγ,再构建成多拷贝重组质粒pPICZaA/(hbscfv-ifnγ)1.2.4,然后转入巴斯德毕赤酵母X33.从中筛选出的工程菌株X4能够分泌表达目的蛋白HBscFv-IFNγ,并用SDS-PAGE.Western blotting和ELISA方法进行了初步鉴定.结果表明组成HBscFv-IFNγ的HBscFv和IFNγ仍具有生物学活性.用14F7亲合层析纯化X4的发酵液可获得纯度迭95
作者:周世水;王小宁
来源:生物工程学报 2008 年 24卷 3期