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铜绿假单胞菌是临床上常见致病菌,传统的检测方法有各种弊端.本研究对该细菌的ETA基因用生物信息学方法加以分析,选取相对保守且高度特异的DNA序列,设计一对特异性引物和一个TaqMan探针,建立FQ-PCR(fluorescence quantitative PCR)检测PA的方法.通过对梯度浓度的铜绿假单胞菌基因组DNA样品进行FQ-PCR检测和对多种细菌的DNA进行扩增,来检测其灵敏度和验证引物和探针的特异性.试验结果表明,对比现有的检测方法.以ETA基因为靶基因,基于TaqMan探针的快速FQ-PCR检测技术有更高的灵敏度和更好的特异性等优点,具有很好的研究价值和应用前景.

作者:肖性龙;张经纬;龚俊;潘艳萍;余以刚;杨晓泉;吴晖

来源:生物工程学报 2008 年 24卷 4期

知识库介绍

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作者:
肖性龙;张经纬;龚俊;潘艳萍;余以刚;杨晓泉;吴晖
来源:
生物工程学报 2008 年 24卷 4期
标签:
铜绿假单胞菌 外毒素A 荧光定量PCR TaqMan探针 检测
铜绿假单胞菌是临床上常见致病菌,传统的检测方法有各种弊端.本研究对该细菌的ETA基因用生物信息学方法加以分析,选取相对保守且高度特异的DNA序列,设计一对特异性引物和一个TaqMan探针,建立FQ-PCR(fluorescence quantitative PCR)检测PA的方法.通过对梯度浓度的铜绿假单胞菌基因组DNA样品进行FQ-PCR检测和对多种细菌的DNA进行扩增,来检测其灵敏度和验证引物和探针的特异性.试验结果表明,对比现有的检测方法.以ETA基因为靶基因,基于TaqMan探针的快速FQ-PCR检测技术有更高的灵敏度和更好的特异性等优点,具有很好的研究价值和应用前景.