D-甘露醇广泛应用于食品、制药、化学品工业等领域.从野生型大肠杆菌出发,将来自假肠膜明串珠菌Leuconostoc pseudomesenteroides ATCC 12291菌株的甘露醇脱氢酶与果糖转运蛋白编码基因整合到大肠杆菌ATCC8739的染色体中,并失活其他的发酵途径(丙酮酸甲酸裂解酶、乳酸脱氢酶、富马酸还原酶、乙醇脱氢酶、甲基乙二醛合成酶和丙酮酸氧化酶),构建了一株遗传稳定的D-甘露醇生产菌株.使用无机盐培养基和葡萄糖果糖作为混合碳源,厌氧发酵6d,D-甘露醇产量达1.2 mmol/L.基于细胞生长和D-甘露醇合成的偶联,进一步通过代谢进化技术提高细胞合成D-甘露醇的生产能力.经过80代的驯化,D-甘露醇产量提高了2.6倍,甘露醇脱氢酶的活性提高了2.8倍.构建获得的遗传稳定的工程菌能直接发酵糖生产D-甘露醇,不需添加抗生素、诱导剂和甲酸,在工业化生产时有一定优势.
作者：王小芳；陈晶；刘萍萍；徐洪涛；郁彭；张学礼
来源：生物工程学报 2013 年 29卷 10期
