对NADPH依赖的甘露醇脱氢酶的异源表达和对果糖的转化情况进行分析,为在细胞内构建甘露醇的合成途径奠定基础.构建重组菌株BL21(DE3)/pET28a-mdh,对其进行诱导发酵后,通过His标签对目的蛋白进行纯化,并利用HPLC分析纯化后的甘露醇脱氢酶转化果糖生成甘露醇的情况.成功构建了NADPH依赖的甘露醇脱氢酶重组表达菌株BL21(DE3)/pET28a-mdh,并对表达后的甘露醇脱氢酶进行了纯化,测得纯化后的甘露醇脱氢酶酶活力为270 U/mL.对酶法转化果糖得到甘露醇的转化条件进行优化,确定最佳的转化条件为:当底物浓度为300 g/L,反应初始pH5.8,温度40℃,NADPH终浓度为9 mmol/L时,甘露醇转化率可以达到97.4
作者：封志媚；赵雅童；刘业学；路福平；李玉
来源：生物技术通报 2017 年 33卷 8期
