1,2,4-丁三醇(BT)是一种在工业中有多种用途的重要的非天然化合物.文中通过将外源基因xdh和mdlC导入大肠杆菌BW25113表达,并敲除了xylA、xylB、yagE、yjhH、yiaE和ycdW等木糖和中间产物代谢旁路基因,构建了能够将D-木糖转化为BT的重组菌株.为优化BT合成途径,针对BT合成途径中的限速步骤——3-脱氧-D-甘油-戊酮糖酸的脱羧反应,进行了新酶的筛选和评价,获得了可显著提高反应效率的新的2-酮酸脱羧酶——KivD,并构建了表达该酶的重组菌株BW-025.在此基础上,通过初步条件优化,将BT产量提高至2.38 g/L;进一步调节途径中各个酶的表达量,探究了它们对BW-025合成BT的影响,最终获得了BT产量较BW-025提高了48.62%的重组菌株BW-074.
作者:孙雷;杨帆;朱泰承;李兴华;孙红兵;李寅;许正宏;张延平
来源:生物工程学报 2016 年 32卷 1期