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Calpain是钙依赖性中性蛋白酶,根据其对钙敏感性的不同,可分为m-和μ-calpain两型.分别用不同浓度CaCl2溶液孵育Wistar大鼠脑皮质匀浆液,并用蛋白质印迹和定量图像分析技术检测不同亚型calpain对tau蛋白的降解作用.研究发现:在37℃用1 mmol/L Ca2+孵育底物15 min,可见tau蛋白明显降解,并在分子质量为29 ku处出现tau蛋白降解片段;当Ca2+浓度为5 mmol/L时,tau蛋白几乎全部被降解;这种tau蛋白降解可被calpain特异性抑制剂完全逆转.进一步的研究发现,分别用μ-calpain抑制剂(0.05 μmol/L calpastatin),m-calpain抑制剂(100 μmol/L calpain inhibitor Ⅳ)或总calpain抑制剂(552 μmol/L calpeptin)与1 mmol/L Ca2+共同孵育Wistar大鼠脑皮质匀浆液,Ca2+激活的tau蛋白降解分别被抑制8.6

作者:方征宇;刘世杰;王小川;刘蓉;王群;陈正跃;王建枝

来源:生物化学与生物物理进展 2003 年 30卷 6期

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作者:
方征宇;刘世杰;王小川;刘蓉;王群;陈正跃;王建枝
来源:
生物化学与生物物理进展 2003 年 30卷 6期
标签:
钙依赖性中性蛋白酶 tau蛋白 钙离子 阿尔茨海默病 calpain tau calcium Alzheimer′s disease
Calpain是钙依赖性中性蛋白酶,根据其对钙敏感性的不同,可分为m-和μ-calpain两型.分别用不同浓度CaCl2溶液孵育Wistar大鼠脑皮质匀浆液,并用蛋白质印迹和定量图像分析技术检测不同亚型calpain对tau蛋白的降解作用.研究发现:在37℃用1 mmol/L Ca2+孵育底物15 min,可见tau蛋白明显降解,并在分子质量为29 ku处出现tau蛋白降解片段;当Ca2+浓度为5 mmol/L时,tau蛋白几乎全部被降解;这种tau蛋白降解可被calpain特异性抑制剂完全逆转.进一步的研究发现,分别用μ-calpain抑制剂(0.05 μmol/L calpastatin),m-calpain抑制剂(100 μmol/L calpain inhibitor Ⅳ)或总calpain抑制剂(552 μmol/L calpeptin)与1 mmol/L Ca2+共同孵育Wistar大鼠脑皮质匀浆液,Ca2+激活的tau蛋白降解分别被抑制8.6