通过(NH4)2SO4分级沉淀、HiPrep 26/10 Desalting凝胶色谱脱盐、Source 15 Q阴离子交换色谱技术,里氏木霉(Rut C-30)纤维素酶主要组分得以初步分开,再经过Source 15 S阳离子交换色谱、HiPrep Sephacryl S-100 HR凝胶过滤色谱、Superdex 75 PrepGrade凝胶过滤色谱进一步分离纯化,得到2个纯化的内切葡聚糖酶组分EGⅡ、EGⅠ和一个外切葡聚糖酶组分CBHⅠ;经过SDS-PAGE电泳鉴定为电泳纯,测得相对分子质量分别为5.22×104,5.62×104和6.90×104.EGⅡ的最适反应pH是5.6,最适反应温度为65 ℃;EGⅠ的最适反应pH是4.4,最适反应温度为55 ℃;以羧甲基纤维素(CMC)为底物时,EGⅠ、EGⅡ的米氏常数(Km )分别为2.20 mg/mL、3.38 mg/mL.CBHⅠ的最适反应pH是5.8,最适反应温度为60 ℃,以对硝基苯基-β-D-纤维二糖苷(PNPC)为底物时,米氏常数(Km )为0.12 mg/mL.
作者：朱年青；夏文静；勇强
来源：生物加工过程 2010 年 08卷 3期
