利用GenBank和UniProt数据库比对Morganella morganii J-8羰基还原酶基因和氨基酸序列,以同源性为依据,结合高效液相色谱(HPLC)检测验证,筛选出5株同样具有转化1-苯基-2-甲氨基丙酮(MAK)产d-伪麻黄碱功能的菌株.选取其中1株Bacillus clausii B0658,对其d-伪麻黄碱的生物转化过程进行考察,发现在最优条件下d-伪麻黄碱产量达到128.3 mg/L.进一步对B.clausii B0658的亮氨酸脱氢酶基因bcdh进行扩增,以pET28a(+)为载体构建重组质粒并在Escherichia coli BL21(DE3)中实现表达,通过重组菌的生物转化实验验证该酶的催化功能.
作者：柴满坤；张梁；顾正华；丁重阳；石贵阳
来源：生物加工过程 2013 年 11卷 3期
