在摇瓶中对共表达亮氨酸脱氢酶（ LeuDH）和甲酸脱氢酶（ FDH）的重组大肠杆菌（ E?coli）的发酵条件进行优化。首先考察基础培养基中碳、氮源种类和浓度及初始pH等因素对重组大肠杆菌生长和产酶的影响，实验结果表明甘油和酵母膏为最佳碳源和氮源，最适质量浓度均为10 g／L，培养基最适初始pH为8?0。然后对诱导条件进行优化，确定最适的诱导时机为菌体密度（ OD600）达到0?6时，最适的诱导温度、诱导剂IPTG浓度和诱导时间分别为25℃、0?2 mmol／L和20 h。在优化后的培养条件下，菌体密度（ OD600）可达8?6，LeuDH和FDH酶比酶活分别达1543?3和2572?4 U／L，是优化前的2?0和3?1倍。
作者：刘维明；杨震炯；罗积杏；壮晓健；沈文和；胡燚；黄和
来源：生物加工过程 2015 年 4期
