以Lactobacillus casei染色体基因组为模板，PCR扩增获得磷脂酶A2基因pla2，以pET 28a（＋）为载体构建重组表达质粒pET 28a（＋） pla2。通过IPTG诱导实现磷脂酶A2在E．coli DE3中的重组表达。对诱导条件初步优化后，重组菌酶活最大可达2?8 U/mL。通过Ni 螯合柱对目的蛋白进行纯化，SDS PAGE分析重组磷脂酶A2相对分子质量为1?7×104。通过酶学性质分析，最适温度为37℃，最适pH 8，比酶活为110 U/mg。
作者：刘丹丹；张梁；顾正华；丁重阳；石贵阳
来源：生物加工过程 2014 年 4期
