从菜园土壤中取样，在含有谷氨酸的筛选培养基上采用梯度稀释涂布、平板划线的方法，以菌落/菌液黏稠度为指示，分离筛选生产γ多聚谷氨酸的菌株。利用氨基酸分析仪测定提取纯化后的γ多聚谷氨酸的产量，并通过形态学、生理生化特征以及16S rDNA基因序列分析鉴定该菌株，并对其合成γ多聚谷氨酸的功能基因进行PCR扩增。结果表明：筛选到1株产γ多聚谷氨酸的细菌C1，其液体摇瓶发酵产量为18?4 g/L，相对分子质量为1?8×106；该菌株为革兰氏阳性，菌落黏稠、菌体呈杆状、产芽胞、且形成荚膜；主要生理生化特点为能利用葡萄糖和蔗糖发酵，水解淀粉，H2 O2酶阳性，产吲哚等；经16S rDNA鉴定与Bacillus amyloliquefaciens ATCC 23350同源性为100％，故命名为Bacillus amyloliquefaciens C1，且拥有γ多聚谷氨酸合成的相关基因pgsA、pgsB和pgsC。
作者：何剑；雍晓雨；周俊；王舒雅；陈怡露；郑涛
来源：生物加工过程 2014 年 4期
