采用基因工程方法对酿酒酵母进行代谢改造，使酵母产生乳酸代谢途径。将来源于 L． mesenteroides和E?coli的D 乳酸脱氢酶基因，分别插入带有G418抗性的酵母穿梭质粒pYX212 kanMX上，电转化酵母，得到2株生产D 乳酸的酿酒酵母重组菌S? cerevisiae WE1510和S? cerevisiae WB1186。进一步摇瓶发酵试验表明：重组菌S? cerevisiae WB1186在YEPD培养基、20 g／L糖、pH 5的条件下生长条件最好，并具有更好的产乳酸能力。经3 L发酵罐条件下验证，S． cerevisiae WB1186分批发酵96 h，最终乳酸积累量达到18?0 g／L；发酵条件为培养基YEPD，接种量10％，溶解氧（DO）30％，转速150 r／min，初始葡萄糖质量浓度10 g／L，控制pH 5?0，通气量3 L／min，OD600最大值转为厌氧发酵。
作者：汪兆峰；石贵阳；张梁
来源：生物加工过程 2015 年 6期
