为了达到对动物源性成分快速、准确的检定,对提取动物源性基因组DNA的方法进行了比较分析。考察酚三氯甲烷法、聚乙烯吡咯烷酮法( PVP法)和试剂盒法这3种方法对DNA提取的浓度、纯度及实时荧光PCR扩增效果的影响。结果表明:酚三氯甲烷法提取DNA浓度最高,试剂盒法纯度最高且实时荧光PCR扩增效果最好,但PVP法操作简单、安全、经济,提取的DNA用于实时荧光PCR扩增检出限可达1?98 pg/μL。使用PVP法对市场上10份不同类型的动物性产品进行了检测,检出两份产品中含有猪源性成分。 PVP法应是3种方法中的首选方法,本文为实验室选择合适的DNA提取方法提供了依据。
作者:王萍;乔勇升;韩芷玲
来源:生物加工过程 2015 年 6期