γ聚谷氨酸（γ PGA）的微生物合成是高消耗氧的生物过程，采取基因工程手段改造γ PGA生产菌株Bacillus subtilis NX 2，以提高细胞利用氧的能力。利用重叠 PCR 方法将 P43强启动子与透明颤菌血红蛋白（ VHb）基因vgb拼接，插入大肠杆菌枯草芽胞杆菌穿梭质粒pMA5上，得到重组质粒pMA5 P43 vgb，并将其转化至B． subtilis NX 2中，从而获得重组菌B．subtilis NX 2（ vgb＋）。经SDS PAGE分析和CO差光谱法证明VHb能在γ PGA生产菌株中成功表达，且具有生理活性，大小约为1?6×104。在7?5 L发酵罐上对重组菌B． subtilis NX 2（ vgb＋）进行发酵性能考察，结果显示：重组菌比出发菌的生物量提高了41?2％，γ PGA 的产量提高了7?5％，传代多次表明重组菌具有良好的发酵稳定性。该研究为γ PGA的进一步工业化生产奠定了基础。
作者：汤宝；冯小海；张丹；许宗奇；姜永翔；李莎；徐虹
来源：生物加工过程 2016 年 14卷 2期
