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壳寡糖具有抗炎、抗肿瘤及激活植物免疫等一系列生物活性,这些生物活性的发挥与其结构直接相关.为最大程度发挥壳寡糖的生物活性并确定其结构与功能关系,有必要制备不同结构特征的壳寡糖.笔者优化并全基因合成环状芽胞杆菌壳聚糖酶基因,利用毕赤酵母进行分泌表达;用该酶水解制备低脱乙酰度壳寡糖,使用超高效液相色谱四极杆飞行时间质谱对其组分进行分离及鉴定,使用核磁共振确定其末端结构特征.结果表明:所得壳聚糖酶蛋白质量浓度达0.77 mg/mL,水解产物中包含至少37种不同的壳寡糖组分,这些组分的还原末端主要由氨基葡萄糖组成,非还原末端同时包含氨基葡萄糖及N乙酰氨基葡萄糖.本研究为壳寡糖结构与功能关系的阐释奠定基础.

作者:程功;焦思明;贾培媛;任立世;冯翠;张毓宸;李建军;杜昱光

来源:生物加工过程 2019 年 17卷 1期

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作者:
程功;焦思明;贾培媛;任立世;冯翠;张毓宸;李建军;杜昱光
来源:
生物加工过程 2019 年 17卷 1期
标签:
环状芽胞杆菌 壳聚糖酶 毕赤酵母 壳寡糖 超高效液相色谱四极杆飞行时间质谱 核磁共振
壳寡糖具有抗炎、抗肿瘤及激活植物免疫等一系列生物活性,这些生物活性的发挥与其结构直接相关.为最大程度发挥壳寡糖的生物活性并确定其结构与功能关系,有必要制备不同结构特征的壳寡糖.笔者优化并全基因合成环状芽胞杆菌壳聚糖酶基因,利用毕赤酵母进行分泌表达;用该酶水解制备低脱乙酰度壳寡糖,使用超高效液相色谱四极杆飞行时间质谱对其组分进行分离及鉴定,使用核磁共振确定其末端结构特征.结果表明:所得壳聚糖酶蛋白质量浓度达0.77 mg/mL,水解产物中包含至少37种不同的壳寡糖组分,这些组分的还原末端主要由氨基葡萄糖组成,非还原末端同时包含氨基葡萄糖及N乙酰氨基葡萄糖.本研究为壳寡糖结构与功能关系的阐释奠定基础.