利用PCR技术从海南山蛭体内分离山蛭素(抗凝血蛋白)基因,首先需获得不带有山蛭体表色素且完整的山蛭基因组DNA,本试验通过结合使用SDS-蛋白酶裂解法和CTAB法,有效的去除了山蛭基因组DNA提取过程中难以去除的色素,得到的基因组DNA保持完整,无降解.以之作为模板,进行PCR扩增,获得一个长度约为237bp的特异性片段,此片段与印度山蛭蛭素的cDNA大小几乎一致.初步表明,这个序列没有内含子,而仅是海南山蛭蛭素的编码序列.
作者:谭琳;康由发;施江;郑学勤
来源:生物技术 2003 年 13卷 3期