大肠杆菌自身代谢特征具有发酵生产双乙酰的天然优势.利用PCR技术,以广泛用于双乙酰生产的Lactococcus lactis基因组DNA为模板,克隆得到α-乙酰乳酸合成酶基因α-als,将其构建在表达载体pET-30a上.与能够高效表达3种大肠杆菌来源HSP 70家族分子伴侣的pKJE 7质粒共同转化E.coli BL21(DE3).利用目的蛋白质分子伴侣共表达的方法,首次获得了能够高效表达具有酶活力的α-乙酰乳酸合成酶的重组大肠杆菌.在静置培养条件下,能够在该菌株的培养基中检测到双乙酰的生成.融合蛋白酶在温度为30-40
作者:赵宏峰;边英男;黄伟达
来源:生物技术通报 2011 年 1期