旨在研究RNAi沉默STAT3基因对人大细胞肺癌NCI-H460细胞增殖的影响.针对STAT3基因mRNA设计合成5条短发夹DNA,构建重组SiRNA-ST3质粒(命名为SiRNA-ST3-1,2,3,4,N).用重组质粒分别转染NCI-H460细胞,RT-PCR法检测转染24h后STAT3 mRNA的表达；Western blotting法检测转染24h和48 h后STAT3、pSTAT3蛋白表达；MTT法检测转染24 h、48h、72 h后NCI-H460细胞增殖情况.结果显示,SiRNA-ST3载体构建成功.RT-PCR和Western blotting检测结果表明,NCI-H460细胞转染重组质粒SiRNA-ST3-2和SiRNA-ST3-3后STAT3基因mRNA转录和STAT3、pSTAT3蛋白表达都明显下降(P＜0.05).与未转染组比,SiRNA-ST3-2组和SiRNA-ST3-3组NCI-H460增殖能力24h、48 h降低明显(P＜0.05)；与SiRNA-ST3-N组比,SiRNA-ST3-2组和SiRNA-ST3-3组NCI-H460增殖能力48 h降低明显(P＜0.05).由此证实,构建的重组质粒SiRNA-ST3-2、SiRNA-ST3-3能有效靶向沉默STAT3基因,并抑制人大细胞肺癌NCI-H460细胞的增殖能力.
作者：夏武；贾岩龙；朱武凌；程娜；陈永凤；刘巨源
来源：生物技术通报 2012 年 6期
