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目的:研究siRNA (small interference RNA)对大细胞肺癌细胞株NCI-H460 bcl-2基因表达的影响.方法:利用Ambion公司提供的设计软件和试剂盒,设计合成以bcl-2基因为靶标的siRNA,通过脂质体将合成的siRNA转入NCI-H460细胞株,设置转染bcl-2反义药物G3139和空白两对照组.用MTT法检测siRNA对细胞生长的作用;流式细胞仪检测细胞周期的改变和Bcl-2蛋白表达;RT-PCR检测bcl-2 mRNA水平.结果:siRNA组与对照组细胞存活率均有显著性差异(P<0.05);siRNA组bcl-2的mRNA明显低于对照组和反义组(P<0.05);siRNA组Bcl-2蛋白阳性率明显低于对照组和反义组,siRNA组以及反义组细胞阻滞于S期.结论:体外转录合成的siRNA可抑制NCI-H460细胞bcl-2基因的表达,抑制率可达50

作者:胡海燕;张洹

来源:暨南大学学报(自然科学与医学版) 2005 年 26卷 2期

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作者:
胡海燕;张洹
来源:
暨南大学学报(自然科学与医学版) 2005 年 26卷 2期
标签:
小干扰RNA bcl-2基因 大细胞肺癌细胞株NCI-H460
目的:研究siRNA (small interference RNA)对大细胞肺癌细胞株NCI-H460 bcl-2基因表达的影响.方法:利用Ambion公司提供的设计软件和试剂盒,设计合成以bcl-2基因为靶标的siRNA,通过脂质体将合成的siRNA转入NCI-H460细胞株,设置转染bcl-2反义药物G3139和空白两对照组.用MTT法检测siRNA对细胞生长的作用;流式细胞仪检测细胞周期的改变和Bcl-2蛋白表达;RT-PCR检测bcl-2 mRNA水平.结果:siRNA组与对照组细胞存活率均有显著性差异(P<0.05);siRNA组bcl-2的mRNA明显低于对照组和反义组(P<0.05);siRNA组Bcl-2蛋白阳性率明显低于对照组和反义组,siRNA组以及反义组细胞阻滞于S期.结论:体外转录合成的siRNA可抑制NCI-H460细胞bcl-2基因的表达,抑制率可达50