旨在研究发酵过程中产生的乙酸对重组大肠杆菌BL21(DE3)/pET15b-TreS的生长以及重组海藻糖合酶基因表达的影响,并对其作用机理进行探讨.通过外源添加乙酸(钠)的方法,研究了乙酸钠对重组菌BL21(DE3)/pET15b-TreS生长曲线的影响;利用环境扫描电子显微镜,观察了重组菌形态的变化情况;通过测定菌液的电导率值变化、菌液上清中OD260的变化,研究了乙酸(钠)对菌体细胞膜渗透性、完整性的影响;通过测定菌液上清中β-半乳糖苷酶的活性检测了乙酸钠对菌体细胞内膜的影响;利用荧光分析法检测了乙酸对菌体膜蛋白构象的影响;采用SDS-PAGE电泳研究了乙酸钠对菌体重组海藻糖合酶表达量的影响.结果表明,乙酸(钠)会对重组菌的生长产生一定的抑制作用,可以导致菌体细胞的表面出现凹陷、皱缩;并会影响细胞膜的渗透性、完整性,使得一些细胞内容物发生泄漏;影响细胞膜上的膜蛋白构象,对膜的结构造成一定程度的破坏;对重组海藻糖合酶的表达产生影响.乙酸(钠)对重组菌菌体的生长及重组海藻糖合酶基因的表达有影响,并且菌体细胞膜是其作用的一个靶点.
作者：戴琨；王腾飞；郝昭程；汤丹丹；刘红娟；王瑞明
来源：生物技术通报 2015 年 31卷 5期
