运用枯草芽孢杆菌中的麦芽糖诱导型启动子调控元件,构建得到麦芽糖诱导海藻糖合成酶的安全表达系统,使其制备的海藻糖能够广泛应用于食品医疗行业.以来源于恶臭假单胞杆菌KT2440(Pseudomonas putida KT2440)的海藻糖合成酶基因TreS为报告基因,以cre序列定点突变(CG碱基突变为AT碱基)优化后的麦芽糖诱导型的枯草芽孢杆菌操纵元启动子Pglv为调控元件、大肠杆菌-枯草芽孢杆菌穿梭质粒PHT01为载体骨架,通过BamH I和AatII限制酶酶切替换,构建得到高效表达载体Pglv-PHT01-TreS,将质粒电转化到B.subtilis WB800n并验证其表达效果.成功构建了海藻糖合成酶高效表达质粒Pglv-PHT01-TreS,并实现了该重组质粒在B.subtilis WB800n中的表达.利用基础发酵培养基优化发酵条件验证结果表明,菌体生长到发酵液吸光值OD600达到1.2时加入终质量分数4.5
作者：刘强；王腾飞；汪俊卿；王希晖；王瑞明
来源：生物技术通报 2017 年 33卷 3期
