通过PCR扩增软化芽孢杆菌α-CGT酶基因,将基因片段分别克隆到毕赤酵母表达载体pPIC9K和大肠杆菌-枯草杆菌穿梭载体pMA5中,分别转化毕赤酵母KM71和枯草杆菌WB600.结果表明,重组毕赤酵母发酵上清液中α-CGT酶活性仅0.2 U/mL,重组枯草杆菌产酶达到1.9 U/mL.对重组枯草杆菌发酵条件进行了优化,当以TB为出发培养基,初始pH 6.5,温度为37℃时,摇瓶培养24 h后α-CGT酶环化活性达到4.5 U/mL(水解活性为3200 IU/mL),是野生菌株软化芽孢杆茵表达量的9.8倍.
作者：张佳瑜；吴丹；李兆丰；陈晟；陈坚；吴敬
来源：生物工程学报 2009 年 25卷 12期
