经克隆哈氏弧菌谷胱甘肽还原酶（GR）基因，并构建其原核表达载体，以获得相应的表达蛋白。将GR和pET-32a（+）通过BamH I和Xho I双酶切后，体外用T4连接酶连接，构建重组质粒pET-GR；然后转化至大肠杆菌BL21（DE3）中，利用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）诱导表达，应用SDS-PAGE分析表达情况和表达条件。SDS-PAGE电泳获得分子量约为68.9 kD融合蛋白条带。在E.coli BL21（DE3）中重组质粒pET-GR的表达条件为28℃，0.7 mmol/L的IPTG浓度诱导4 h表达量最高，且主要以包涵体形式表达。哈氏弧菌谷胱甘肽还原酶基因在大肠杆菌中获得了高效表达。
作者：朱帆；丁燏；鲁义善；简纪常；吴灶和
来源：生物技术通报 2015 年 6期
