豹蛙抗瘤酶（Onconase，ONC），又称豹蛙酶，对多种肿瘤细胞和实体瘤具有显著杀伤作用，为得到高表达的ONC，利用HSA在毕赤酵母系统中的表达优势，将HSA和ONC融合进行毕赤酵母表达并分离纯化。设计融合基因HSA-（Gly4Ser1）3-ONC，简称HSA-ONC，构建至3种表达载体pPIC9、pPIC9K、pPICZα-A并分别转染X-33、GS115和SMD11683种宿主菌，在摇瓶和10 L规模优化表达条件和双水相偶联柱层析分离纯化目的蛋白并测定其生物学活性。结果显示，在1 L摇瓶规模下，pPICZα-A/X-33/HSA-ONC组合的表达量优于其他组合，且在pH7，温度23℃条件下诱导10 d，表达量达到最高（235 mg/L）。在10 L规模进行不同培养基条件的发酵，rHSA-ONC于pH 7的低盐基础盐培养基（Low salt basic salt medium，LS-BSM），甲醇浓度0.25
作者：杨刚刚；马诚凯；史世会；张全义；王泽；吕中原；王绪洋；许晓亚；崔晴晴；张继红；丁一；徐存拴
来源：生物技术通报 2015 年 10期
