为了实现原核表达的途径高效获取抗菌肽蛋白,以RT-PCR的方法反转录合成家蝇的抗菌肽diptericin基因,并克隆至pGEX-4T-1载体上,转化至大肠杆菌BL21宿主菌进行表达。测序结果显示,RT-PCR克隆到长345bp的家蝇diptericin基因,重组菌经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导后,通过SDS-PAGE电泳和Western-blot检测到目的蛋白的融合表达,结果表明带有GST标签的融合蛋白大小约为37kD,并且通过GST纯化柱纯化得到了目的蛋白。
作者:卢敏;白杰;魏凤仙;王琳燚;徐彬;尹清强;李绍钰
来源:生物技术通报 2016 年 32卷 6期