为了获得具有高性能的多铜离子氧化酶,从极端微生物嗜碱芽孢杆菌(Bacillus clausii KSM-K16)中克隆表达了其芽孢外衣蛋白 CotA。根据 B. clausii KSM-K16的 CotA 序列及大肠杆菌密码子的偏爱性,设计和合成出该基因全长序列,构建pET28a-cotA 重组表达载体,将其转化到 Escherichia coli BL21(DE3)并诱导表达出重组蛋白,纯化并研究了 CotA 部分生化特性。重组 CotA 约62 kD,表现出蓝绿色并在波长609 nm 有铜离子特征吸收峰,能氧化 ABTS、SGZ 和胆红素等底物;以 SGZ 为底物,最适 pH 和温度分别为7.5和90℃;在80℃孵育2 h,能保持70
作者:刘友勋;闫明阳;耿园园;黄娟
来源:生物技术通报 2016 年 32卷 8期