旨在原核表达并纯化新型重组毒素rCCK96-104PE38,验证其对结肠癌细胞的靶向杀伤作用.使用基因扩增技术将反向编译的胆囊收缩素CCK96-104与绿脓杆菌外毒素PE38融合,构建原核表达载体.利用Ni-NTA亲和层析进行纯化.通过结肠癌细胞体外杀伤实验以及结肠癌裸鼠模型的治疗验证rCCK96-104PE38的抗肿瘤能力.结果显示,扩增出的rCCK96-104PE38序列正确,成功利用pET-28a原核表达系统实现了活性表达.纯化后的重组蛋白能够在体外诱导结肠癌细胞凋亡,并能抑制裸鼠模型体内的肿瘤生长.成功制备高纯度、无标签的rCCK96-104PE38重组免疫毒素,体内、体外实验证实其具有抑制结肠癌的能力.
作者：张嵩；柳溪林；李萌；常江；高世奇；胡盼；柳增善
来源：生物技术通报 2017 年 33卷 4期
