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研究共利用葡萄糖、木糖对重组大肠杆菌合成D-1,2,4-丁三醇(BT)的影响,并优化混合底物时重组菌株合成丁三醇的培养条件.通过敲除影响磷酸转移酶系统(PTS)运行的基因,构建共利用葡萄糖-木糖的合成BT重组菌株,考察了mtfA敲除及mlc过表达菌株MJ133k-ΔmtfA-PTMXM的摇瓶培养条件.结果显示:分别敲除基因ptsG、mtfA和pgi,可使菌株能同时利用木糖及葡萄糖并促进BT合成.菌株MJ133k-ΔmtfA-PTMXM合成BT的培养基及培养条件为:采用1.5×LB培养基,加入10 g/L CaCO3以控制pH,发酵温度33℃,装液量为60 mL/250 mL;6 h时分别加入葡萄糖5 g/L及木糖20 g/L,24 h再次加入5 g/L葡萄糖,BT合成量达3.36 g/L,是未修饰菌株培养条件优化前BT合成量的4.15倍.表明葡萄糖、木糖共利用有效促进了重组大肠杆菌合成BT.

作者:刘雪丹;杨萌;张静;赵东旭

来源:生物技术通报 2021 年 37卷 9期

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作者:
刘雪丹;杨萌;张静;赵东旭
来源:
生物技术通报 2021 年 37卷 9期
标签:
D-1,2,4-丁三醇;生物合成;混合碳源;发酵条件优化
研究共利用葡萄糖、木糖对重组大肠杆菌合成D-1,2,4-丁三醇(BT)的影响,并优化混合底物时重组菌株合成丁三醇的培养条件.通过敲除影响磷酸转移酶系统(PTS)运行的基因,构建共利用葡萄糖-木糖的合成BT重组菌株,考察了mtfA敲除及mlc过表达菌株MJ133k-ΔmtfA-PTMXM的摇瓶培养条件.结果显示:分别敲除基因ptsG、mtfA和pgi,可使菌株能同时利用木糖及葡萄糖并促进BT合成.菌株MJ133k-ΔmtfA-PTMXM合成BT的培养基及培养条件为:采用1.5×LB培养基,加入10 g/L CaCO3以控制pH,发酵温度33℃,装液量为60 mL/250 mL;6 h时分别加入葡萄糖5 g/L及木糖20 g/L,24 h再次加入5 g/L葡萄糖,BT合成量达3.36 g/L,是未修饰菌株培养条件优化前BT合成量的4.15倍.表明葡萄糖、木糖共利用有效促进了重组大肠杆菌合成BT.