克隆类风湿性关节炎(RA)滑膜细胞(FLS)中的蛋白酪氨酸激酶(PTKs)，并研究它们在RA滑膜细胞异常增殖和侵蚀软骨中的作用。根据已知的PTKs氨基酸序列保守区设计简并引物，采用3′快速末端扩增法(3′RACE)扩增滑膜细胞中PTKs cDNAs的3′末端，将所得序列与Genebank中序列进行比较，以鉴定其是否为已知的PTKs或与PTKs同源的新序列，然后通过RNA点杂交方法分别观察这些PTKs在RA和骨性关节炎(OA)病人滑膜细胞中的表达水平。结果表明，从RA FLS中克隆到6种已知PTKs的cDNAs片段，分别为血小板衍生生长因子受体A(PDGFRA)、胰岛素生长因子 1受体(IGF1R)、含discoidin结构域的受体型酪氨酸激酶(DDR2)、Lyn、Janus激酶1(JAK1)和TYK2。RNA点杂交结果显示，在4个RA病人和2个OA病人的滑膜细胞中，PDGFRA、IGF 1R和DDR2在RA滑膜细胞中的表达水平高于OA滑膜细胞，其它几种激酶在两种细胞中的表达水平相同。说明RA滑膜细胞中至少表达PDGFR、IGF1R、Lyn、DDR2、JAK1和TYK2等6种PTKs，其中PDGFRA、IGF1R和DDR2可能与RA滑膜细胞的过度增殖和对软骨的侵蚀性相关。
作者：王吉村；药立波；吕厚山；刘新平；邓艳春；孙铁铮；聂晓燕
来源：生物技术通讯 2001 年 12卷 1期
