组织特异性表达Cre重组酶的转基因小鼠是进行组织特异性条件敲除研究的关键.采用PCR扩增大鼠胰岛素基因705 bp启动子指导Cre在胰岛细胞中特异表达;同时采用改构的Cre重组酶基因,在其5'端添加有真核核糖体结合序列和核定位序列使Cre重组酶能穿越核膜在细胞核能发挥功能;同时,为了保证原核基因Cre能在真核系统顺利表达,在其3'端添加含内含子的人生长激素基因.构建的表达载体在去除原核序列后用显微注射方法建立转基因小鼠,在出生的27只仔鼠中,PCR检测共获得7只Cre整合阳性的转基因小鼠,整合率26
作者:周江;杨晓;程萱;程静;黄翠芬
来源:生物技术通讯 2002 年 13卷 6期