肥大软骨细胞是软骨细胞的终末分化形式,在软骨内成骨过程中发挥十分关键的作用.为了研究肥大软骨细胞在骨骼发育过程中的功能,文章构建了在8.2kb小鼠X型胶原基因(Col10a1)启动子控制下表达Cre重组酶的转基因小鼠品系(Col10a1(8.2)-Cre).采用显微注射法将11.5 kb的转基因片段导入小鼠基因组.共注射受精卵328枚.获得子代鼠51只,经PCR基因型鉴定有3只在基因组上整合有Cre重组酶基因.PCR检测发现Col10a1(8.2)-Cre转基因在含有肥大软骨细胞的组织中表达.为了检测Cre重组酶表达的强度和组织特异性,转基因小鼠与ROSA26报告小鼠交配,子代ROSA26,Col10a1(8.2)-Cre双转基因小鼠LacZ染色检测的结果显示,Cre重组酶在所有的肥大软骨细胞中表达.原位杂交的结果证实Col10a1(8.2)-Cre转基因表达在肥大区的上端.通过对比发现Col10a1(8.2)-Cre转基因表达的组织特异性和强度均优于之前我们构建的Col10a1(1.0)-Cre转基因品系.以上结果表明,建立的肥大软骨细胞特异性表达Cre重组酶的转基因小鼠品系可以作为一种遗传学工具,介导目的基因在肥大软骨细胞中的献除.
作者：侯宁；杨冠；范雄伟；吴秀山；杨晓
来源：遗传 2009 年 31卷 1期
