运用优化的mRNA差异显示技术分离受内生真菌诱导的差异基因.优化差异显示条件表现在增加锚定引物和随机引物的长度、改变PCR参数和再扩增程序、运用银染显色等.应用这些条件共获得7个阳性差异片段.用未优化的PCR程序1筛选35条差异带,得到3个两端均为随机引物的差示片段.而用优化的PCR程序2,52条差异带中得到9条只能用锚定引物和随机引物才能扩增出的片段.地高辛标记的反向-Northern鉴定为阳性后进行克隆和测序.PCR方法1所得的3个差示片段均无开放的阅读框.PCR程序2得到7个差异表达的基因中,2个为已知基因,5个为未知基因.因此可运用优化的差显技术分离差异表达的基因.
作者：唐明娟；郭顺星；申业；胡鸢雷
来源：生物技术通讯 2003 年 14卷 3期
